細胞内サイバネティック・アバター（以下細胞内CA）の技術の達成には、研究開発項目２で設計・構築された細胞内CAの搭載方法を、研究開発項目５にて選定される細胞種ごとに複数検討し、適した搭載方法を選択する必要があります。

本研究開発項目では、研究開発項目２で設計・構築した細胞内CAを、研究開発項目５にて選定された細胞の細胞膜表面または細胞内部へ効率よく搭載するために、3つの手法に着目して細胞内CAの搭載技術を開発します。
（3-1）では細胞への局所的な高効率搭載が期待される物理刺激を利用した搭載技術を、（3-2）では低侵襲な搭載が期待される細胞の嗜好性に基づいて設計したナノキャリアを利用した搭載技術を、（3-3）では細胞融合法を利用した複数の細胞内CAの同時搭載技術を開発します。

研究開発項目３では、細胞内CAを細胞へ搭載して、検査細胞と除去細胞を作製し、また、標的のがん細胞・老化細胞に対して正確な検査・除去をサポートするためのマーカー分子を搭載するための技術を開発します。これまでに各課題において次の研究を行って参りました。

（3-1） エレクトロメカニカルポレーション法によるCA搭載技術として、培養環境において株化免疫細胞へ遺伝子ベースの細胞内CAを搭載することを達成しました（図1）。さらに、生体組織への局所的なCA搭載技術として、購入したモデル組織に対して深度を制御して穿孔できる技術を構築しました。

（3-2） 非ウイルス性のCA搭載細胞作製技術として、脂質を主成分とするナノ粒子を細胞に合わせて設計・作製し、培養環境において、株化免疫細胞へ複数種の遺伝子ベースの細胞内CAを搭載することを達成し（図２）、さらに付与した遠隔制御性を確認しました。

（3-3） 細胞同士の融合を利用した細胞内CAの搭載技術として、株化免疫細胞2種類に対して、キャリア細胞との融合とモデル分子の搭載を達成しました（図３）。また、融合後に余分な細胞核を排除する過程において、一方の細胞核を選択的に排除するための知見を見出しました。