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核酸結合性タンパク質
(Romanesco/ChrocodiLE)

岡田 康志(理化学研究所)

発明のポイント

  • ◎Romanesco :標的プロモーターに導入
    ⇒ mRNAの動態を生細胞中で可視化
  • ◎ChrocodiLE :オープン状態のDNAに配列非依存的に結合
    ⇒ ゲノムの立体構造の経時変化を生細胞中で追跡可

下矢印

生細胞中で核酸(DNA・mRNA)の動態をイメージング

発明の概要

[Romanesco]

転写の模式図

(細胞中における転写動態のイメージング)

直後
細胞中における転写動態の顕微鏡写真:直後
下矢印
6時間後
細胞中における転写動態の顕微鏡写真:6時間後
下矢印
12時間後
細胞中における転写動態の顕微鏡写真:12時間後
下矢印
24時間後
細胞中における転写動態の顕微鏡写真:24時間後

[ChrocodiLE]

蛍光タンパク質の発光の仕組みの模式図
(ノックインマウスの組織観察例)
海馬
ノックインマウスの組織観察例の顕微鏡写真:海馬
小脳皮質
ノックインマウスの組織観察例の顕微鏡写真:小脳皮質
皮膚繊維芽細胞
ノックインマウスの組織観察例の顕微鏡写真:皮膚繊維芽細胞

従来技術・競合技術との比較・優位性

[Romanesco]

  • ◎ 従来技術(Broccoli)と比べて蛍光強度が300倍
  • ◎ タンパク質とmRNAの同時計測で転写活性が分析可
転写活性の顕微鏡写真
上段左
mScarlet-I
上段中
Romanesco
上段右
合体映像
下段左
mScarlet-I
下段中
従来技術(EGFP)
下段右
合体映像

[ChrocodiLE]

従来技術では確認できなかったオープン領域の配列を確認

【DNAシーケンサーによるゲノム配列解析】
DNAシーケンサーによるゲノム配列図
従来技術では確認できなかったオープン領域の配列
上段
ChrocodiLE
中段
従来技術1
下段
従来技術2

想定される用途

  • ◎ 薬物応答性遺伝子(薬物代謝酵素、薬物運搬タンパク質など)の体内挙動追跡用プローブ
  • ◎ 特定神経組織における神経細胞分化や神経組織修復時における発現遺伝子の生細胞での解析
  • ◎ 特定疾患(がん、糖尿病、アルツハイマー病など)において発現する遺伝子の生細胞でのイメージング

ライセンス可能な特許

  • ◎ Romanesco:
    発明の名称:蛍光発生核酸分子、及び標的RNAの蛍光標識方法
    国際公開番号:WO2020/116446
  • ◎ ChrocodiLE:
    発明の名称:核酸結合性タンパク質
    国際公開番号:WO2020/209332
    登録番号:特許第7356739号(623KB)

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