京都大学 ウイルス・再生医科学研究所の永樂 元次 教授（発生システム制御分野）および、奥田 覚 科学技術振興機構（ＪＳＴ） さきがけ専任研究者（兼任：京都大学 ウイルス・再生医科学研究所 共同研究員、理化学研究所 客員研究員）らの研究グループは、目の丸い形の元となる「眼杯組織」の形態が作られる仕組みを解明しました。生物の形作りは、人の身体の発生や疾患などのさまざまな生命現象に関わるため、基礎研究と医療の両方にとって重要です。特に、試験管の中での「器官の形作り」を理解し操作することは、今後の再生医療に使用する組織の立体形状を制御するためには重要だと考えられています。本研究グループはまず、複雑な眼杯組織の形が作られる仕組みを理解するため、実験で得た眼杯組織の情報を基にしてコンピューターシミュレーションを行いました。そして、眼杯組織の丸い形を作るためには、組織の場所ごとに細胞が異なる力を生み出す必要があると予測しました。また、マウスの胚性幹細胞（ＥＳ細胞）を培養して作製した眼杯組織を使って、この予測を確かめました。さらにその結果から、眼杯組織の丸い形が作られる際には、１つ１つの細胞が、眼杯組織全体の変形度合いを感じながら、その丸い形を微調整していることが分かりました。これらの発見は、「器官の形作り」に対する機械的な力の新しい役割を示しており、今後の再生医療に必要となる、試験管内での複雑な組織・器官の作製に役立ちます。
本成果は、２０１８年１１月２２日（日本時間）に米国の国際学術誌「Ｓｃｉｅｎｃｅ Ａｄｖａｎｃｅｓ」にオンライン掲載されます。
本研究は、科学技術振興機構（ＪＳＴ：さきがけ 研究課題名「１細胞動態の統合モデリングによる三次元組織形成の予測制御」、研究課題番号ＪＰＭＪＰＲ１６Ｆ３）、および、日本医療研究開発機構（ＡＭＥＤ：再生医療実現拠点ネットワークプログラム 疾患・組織別実用化研究拠点（拠点Ａ）・研究開発課題名：視機能再生のための複合組織形成技術開発および臨床応用推進拠点）の一環として行われました。また、本研究は、京都大学および理化学研究所にて実施されました。
＜背景＞
近年、ｉＰＳ細胞やＥＳ細胞を試験管の中で培養し、人工的に作製した細胞・組織を人体へ移植する「再生医療」の研究が盛んに行われています。しかし、試験管の中では、いつも同じ形の組織が作られるわけではなく、作られる組織の形が大きくバラついてしまいます。そのため、現在のところ、網膜のような複雑な構造を持つ器官の立体形状を再現よく作製する技術は実現できていません。この問題を解決するためには、作製する器官の形作りの仕組みを理解し、試験管の中でのその過程を正確に制御する必要があります。
本研究グループは、数多くある器官の中でも、網膜の組織の元となる「眼杯組織」に着目しました（図１）。この眼杯組織は、複数の細胞種からなるカップ状の丸い形をした組織であり、再生医療で移植が検討されている網膜組織を含んでいます。眼杯組織の形作りの過程では、まず、シート状の脳組織の一部が外側へ突き出します。次に、突き出たシート状の脳組織の先端が網膜組織へと分化しながら内側へ入り込み、カップ状の二重構造を作ります。さらに、カップの縁の組織が尖ることで、眼杯組織の丸い形が作られます。
このような目の丸い形は、魚、鳥、人など、さまざまな動物に共通します。また、その元となる眼杯組織の構造は高等学校の生物科目の教科書に登場するように、一般的によく知られています。本研究グループは、以前の研究で、ＥＳ細胞を培養して眼杯組織を作製することに成功し、眼杯組織の丸い形が脳組織から突出した神経組織のみの力で作られることを明らかにしました。また、内側に入り込む領域で特異的にミオシンと呼ばれるタンパク質の活性が弱まることや、細胞増殖がカップ形成に重要な役割をすることが分かっていました。しかし、これらの細胞レベルの現象がカップ全体の形作りにどのように寄与するかはまだ分かっておらず、目の丸い形が作られる詳しい仕組みは未解明なままでした。
＜研究手法・成果＞
眼杯組織の形作りでは、多くの細胞が増殖したり、死んだり、異なる細胞種へと分化したり、変形したりしながら、組織全体の立体的な形を作ります。本研究グループでは、このような複雑な形作りの仕組みを理解するため、コンピューターを使って組織の立体的な動きを予測する、新しいシミュレーション技術を開発しました。このシミュレーション技術により、コンピューター内のバーチャルな世界で器官の形作りを再現し、その仕組みを予測できるようになりました（図２下）。さらに、シミュレーションによって予想された仕組みが正しいかどうかを、ＥＳ細胞から作製した眼杯組織（図２上）を使った実験で確かめ、未知であった眼杯組織の形作りの仕組みを解明しました。
研究の結果、眼杯組織の丸い形は、図３のように作られることが分かりました。はじめに、脳から突出した神経組織の内側の面には、ミオシンが集まり、内側の面を収縮する力が働いています（⓪）。まず、突出した組織の先端が網膜組織へ分化し、内側に溜まったミオシンの働きが弱まることで、網膜組織が自発的に内側へ入り込みます（①）。この網膜組織の自発的な入り込みにより、網膜組織と周辺の網膜色素上皮との境界（カップの縁）の細胞は、無理やり曲げられます（②）。この境界の細胞は、無理やり曲げられたことで生じる機械的な力を感じ取り、それをきっかけにして組織の厚み方向に沿って能動的に収縮することで、網膜組織をさらに内側へ押し込みます（③）。つまり、境界の細胞は、機械的な力を通して、眼杯組織全体の変形度合いを感じながら、その丸い形を微調整していることが分かりました。
本研究グループは、人を含む生物の形作りにおける、新しい組織形態の調節機構を発見しました。これまでの研究で、組織内に広がる液性の分子が組織の形の一部を調節することが分かっていましたが、液性の分子だけでは立体的な組織全体の形の変化を１つ１つの細胞へ正確に伝えることは困難です。一方で、機械的な力は、このような立体的な形の変化を各細胞へ伝えることが可能です。
また、この組織形態の調節機構の発見により、本研究グループで開発したシミュレーション技術が器官の形作りの予測に役立つことが示され、器官の形作りの理解に向けた新しいアプローチとなることを提案しました。このシミュレーション技術により、コンピューター内のバーチャルな世界の中で立体的な組織の形を１細胞のレベルから再現し、その機構を予測することが可能になりました。また、眼杯組織だけではなく他の組織にも応用できます。
＜波及効果、今後の予定＞
本研究グループで発見した組織形態の調節機構は、さまざまな器官の形作りにも共通する可能性があり、基礎生物学における多様な器官の形作りの理解につながることが期待されます。また、この機構をうまく利用することができれば、試験管内での器官の形作りをより正確に制御できる可能性もあります。さらに、この組織形態の調節機構の発見には、コンピューターを使ったシミュレーション技術による予測が役立ちました。したがって、このシミュレーション技術は、他の組織・器官の形作りの理解や、奇形や癌などの疾患の理解にも役立つ可能性があります。そこで今後は、発見した組織形態の調節機構の理解をより深めるとともに、シミュレーション技術の予測精度を高めることにより、さらに複雑な組織・器官の作製を実現し、未来の再生医療へ貢献したいと考えています。
＜参考図＞
図１ 目の丸い形の元となる眼杯組織の形作り
図２ シミュレーションにより再現した眼杯組織の形作り
図３ １つ１つの細胞が機械的な力を通して眼杯組織全体の丸い形を調整する
図４
＜論文情報＞
| タイトル |
“Strain-Triggered Mechanical Feedback in Self-Organizing Optic Cup Morphogenesis”
（眼杯組織の形態形成におけるひずみ惹起性力学フィードバック作用） |
| 著者名 |
奥田 覚、高田 望、長谷川 結子、川田 正子、井上 康博、安達 泰治、笹井 芳樹、永樂 元次 |
| ＤＯＩ |
10.1126/sciadv.aau1354 |
＜お問い合わせ先＞
＜研究に関すること＞
永樂 元次（エイラク モトツグ）
京都大学 ウイルス・再生医科学研究所 教授
Tel：075-751-3810
E-mail：
奥田 覚（オクダ サトル）
科学技術振興機構（ＪＳＴ） さきがけ専任研究者（京都大学 ウイルス・再生医科学研究所 共同研究員）
Tel：075-751-3846
E-mail：
＜ＪＳＴ事業に関すること＞
川口 哲（カワグチ テツ）
科学技術振興機構（ＪＳＴ） 戦略研究推進部
Tel：03-3512-3525 Fax：03-3222-2064
E-mail：
＜ＡＭＥＤ事業に関すること＞
日本医療研究開発機構（ＡＭＥＤ） 戦略推進部 再生医療研究課
Tel：03-6870-2220 Fax：03-6870-2242
E-mail：
＜報道担当＞
京都大学 総務部 広報課 国際広報室
Tel：075-753-5729 Fax：075-753-2094
E-mail：
科学技術振興機構（ＪＳＴ） 広報課
〒102-8666 東京都千代田区四番町５番地３
Tel：03-5214-8404 Fax：03-5214-8432
E-mail：
理化学研究所 広報室 報道担当
Tel：048-467-9272 Fax：048-462-4715
E-mail：
