共同発表：第３の核酸医薬の「ヘテロ２本鎖核酸」の開発～日本発の分子標的核酸医薬の基盤技術～

ポイント

特定の遺伝子を制御して治療する目的の核酸医薬にアンチセンス核酸、ｓｉＲＮＡがあります。これらの従来の核酸医薬とは異なる新しい分子構造・作用機序を有する第３の核酸医薬、「ヘテロ２本鎖核酸（ＨＤＯ）」の開発に成功しました。
ヘテロ２本鎖核酸は従来の核酸医薬よりはるかに高い効果を示し、既存のあらゆるアンチセンス核酸の作用を大幅に向上できます。
従来困難だった肝臓以外での臓器の遺伝子制御が可能になり、核酸医薬の臨床応用の可能性が大きく広がります。ヘテロ２本鎖核酸は日本発の分子標的治療の画期的な基盤技術として期待できます。

この研究は国立研究開発法人科学技術振興機構（ＪＳＴ）戦略的創造研究推進事業（ＣＲＥＳＴ）の研究領域「新機能創出を目指した分子技術の構築」（研究総括：山本尚　教授）、ならびに国立研究開発法人日本医療研究開発機構（ＡＭＥＤ）革新的バイオ医薬品創出基盤技術開発事業などの支援のもとでおこなわれたもので、その研究成果の一部は、国際科学誌Ｎａｔｕｒｅ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ（ネイチャーコミュニケーションズ）に、２０１５年８月１０日午前１０時（英国時間）にオンライン版で発表されます。

＜研究の背景＞

アンチセンス核酸、ｓｉＲＮＡなどの核酸医薬を用いた遺伝子治療は、細胞膜上の分子しか標的にできない抗体医薬と異なって、細胞内のあらゆる遺伝子を制御できます。その汎用性の高さから、今まで治療困難とされてきたさまざまな疾患、特に癌や神経疾患への臨床応用が強く期待されています。核酸医薬は２０１３年に高脂血症薬ミポメルセンが米国で認可されて以来、欧米で急速にその臨床応用は進展しています。一方で、生体内での有効性は未だ不十分で、特に肝臓以外の臓器へのデリバリーが困難であることが最大の問題点です。さらに、アンチセンス核酸やｓｉＲＮＡはその基本特許を欧米に抑えられており、日本での開発には大きな制限があります。次世代分子標的治療薬として有望視されている核酸医薬で、日本がこの新領域をリードするには、有効性が高く、肝臓以外の臓器のデリバリーが可能な新規核酸の基盤技術の開発とその知財が必要です。東京医科歯科大学大学院医歯学総合研究科脳神経病態学分野の横田隆徳　教授の研究グループは、大阪大学などとの共同研究で、既存のアンチセンス核酸、ｓｉＲＮＡと異なる新しい分子構造・作用機序と高い有効性を有する第３の核酸医薬、「ヘテロ２本鎖核酸」の開発に成功しました（図１）。

＜研究成果の概要＞

ヘテロ２本鎖核酸はＤＮＡ鎖を主鎖として、主鎖に相補的なＲＮＡからなる２本鎖の人工機能核酸です。ＤＮＡ鎖の両端に架橋型人工核酸（Ｌｏｃｋｅｄ　ｎｕｃｌｅｉｃ　ａｃｉｄ；ＬＮＡ）を配した「ギャップマー型」にした時、２本鎖の中央部がＤＮＡ／ＲＮＡヘテロ核酸になるため、この部分が細胞内のＲＮＡを分解する酵素であるＲＮａｓｅ　Ｈによって認識され、相補鎖ＲＮＡが切断されます（図２Ａ）。その結果、単独となった主鎖が標的ＲＮＡに結合し、再びＲＮａｓｅ　Ｈが標的ＲＮＡを切断して、遺伝子抑制効果を発揮するデザインです。すなわち、ＲＮａｓｅ　Ｈが相補鎖ＲＮＡと標的ＲＮＡの切断の一人二役を果たすことにより、主鎖であるＤＮＡ鎖の結合親和性に影響を与えることなく相補鎖ＲＮＡにリガンドを結合することが可能になった点が特徴の分子技術です。ＲＮＡ鎖の末端のリガンドには脂質、抗体、ペプチド、糖鎖などさまざまな細胞内外の薬剤送達システムを制御、向上させる分子を結合することが可能です（図２Ｂ）。

我々の特許であるビタミンＥ（ＶＥ）をリガンド分子として相補鎖ＲＮＡに結合させ、静脈投与したところ、低投与量（０．７５ｍｇ／ｋｇ）でも９０－９９％以上と今までにない劇的な抑制率を達成しました。その標的遺伝子抑制効果は、従来のアンチセンス核酸や、ＶＥ結合ｓｉＲＮＡ（ＶＥ－ｓｉＲＮＡ）と比べて飛躍的に高く、現状の核酸医薬で最高水準です（図３）。

この技術によって、ビタミンＥを結合したヘテロ２本鎖核酸をマウスに静脈注射することで、既存のアンチセンス核酸と比較して肝臓での標的遺伝子発現抑制効果を１０－１０００倍に増強することに成功しました。この効果は霊長類であるカニクイザルでも確認できました。最も有効性の高い配列の場合、標的遺伝子発現を半減させるために必要な投与量（ＥＤ５０）は０．０３８ｍｇ／ｋｇとなりました。これは核酸医薬単独では従来報告されたものの中で最も高い有効性となります。さらに有効性が高いため、従来のアンチセンス核酸と比較して同等の効果を得るために必要な核酸量がはるかに少なくなり、その結果として肝機能障害などの副作用を軽減させることも分かりました。さらに、全身投与で肝臓だけでなく心臓、骨格筋、肺、腎臓、脾臓、皮下脂肪など多くの臓器の遺伝子制御が可能であることが判明しました（図４）。

その作用機序は、十分には判明していませんが、短いＤＮＡ／ＲＮＡヘテロ２本鎖核酸は特有の細胞内認識機構と細胞内の輸送系にあって、従来知られている「ＤＮＡを鋳型としてＲＮＡが合成されその情報をもとにタンパク質が合成される」というセントラルドグマや非コードＲＮＡとは異なる未知の分子生物学的機構を利用している可能性を考えています。

＜研究成果の意義＞

１）ヘテロ２本鎖核酸はビタミンＥを薬物送達分子として用いることにより、既存の核酸医薬で最も高い有効性（ＥＤ５０＝０．０３８ｍｇ／ｋｇ）を示し、かつ既存のアンチセンス核酸の有効性を１０－１，０００倍に増強する効果を認め、高い汎用性と大幅なコスト削減、副作用の軽減に成功しました。
２）従来の核酸医薬を凌駕する有効性に加えて、核酸医薬の臨床応用に最大問題点であった全身投与による肝臓以外の臓器の遺伝子制御を初めて可能にしました。
３）その顕著な有効性の背景には、従来知られていない短いＤＮＡ／ＲＮＡによる新規の分子生物学的な機構の存在が示唆されます。
４）ヘテロ２本鎖核酸は基盤技術として、高い汎用性・応用性・発展性を持った日本発の第３の新規核酸医薬であり、その知財も確保され、次世代分子標的薬の構図を塗り替える可能性を秘めています。