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研究成果集

beta−グルコシダーゼ

新規耐熱性beta−グルコシダーゼおよびその製造法、形質転換微生物

研究成果の概要

新規beta−グルコシダーゼを生産するサーマス属に属する新菌株を分離。本菌を用いて耐熱性に優れた新規beta−グルコシダーゼの製造法を開発。(図1)、(図2)

  1. 新菌株(FERM P-9184、9185、9186)
    耐熱性に優れた新規beta−グリコシダーゼを生産するサーマス属に属する新菌株ZK-001

  2. 新規beta−ケルコジダーゼの性質
    本酵素は、セルロースのセルラーゼによる分解産物であるセロビオースあるいはセロオリゴ糖のbeta−グリコシドを効率良く分解するものでなく、beta−ガラクトシドである乳糖に対しても高い分解活性を有する。
    至適pH:4.5〜6.5
    至適作用温度:80〜85DEG C

  3. 酵素の製造法
    サーマス属に属する新菌株をpH5.5〜8.5、40〜80DEG Cで培養する新規beta−グルコシダーゼの製造法

  4. 遺伝子組み換え
    耐熱性beta−グルコシダーゼ遺伝子DNAをベクターを介して大腸菌に導入、形質転換体を得た。本形質転換体を培養して耐熱性beta−グルコシダーゼを製造。
成果展開可能なシーズ、用途等

耐熱性beta−グルコシダーゼ
セロピアーゼ活性の利用
  1. バイオマス(セルロース)の有効利用(食料、燃料として)
    ラクターゼ活性の利用(ガラクトース、グルコースによる活性阻害小)
  2. 乳糖分解乳(液)などの食品への利用
特許出願
  1. サーマス(Thermus)属に属する新菌株、新規なbeta−ガラクトシダーゼ及びその製造法
    特   願:昭62-026216(昭62.2.9) 特開昭63-196267(昭63.8.15)
    出 願 人:新技術事業団、高瀬光徳、掘越弘毅
    請求の概要:サーマス属に属する高度好熱性の新菌株およびその菌株を培養して得られる新規beta−ガラクトシダーゼならびにその製造法。
  2. 耐熱性beta−ケルコシダーゼ遺伝子DNA、該DNAを含む組み換え体プラスミド、該プラスミドを含む形賃転換微生物及び耐熱性beta−グルコシダーゼの製造法
    特   願:昭63-51778(昭63.3.7) 特開平1-225484(平1.9.8)
    出 願 人:新技術事業団、高瀬光徳、掘越弘毅
    請求の概要:サーマス属に属する微生物由来の耐熱性beta−グルコシダーゼ遺伝子DNA、これを含む組み換え体プラスミド、これを導入した形質転換微生物及びこれを培養する耐熱性beta−グルコシダーゼの製造法。

《外国出願》

  1. New strain belonging to genus thermus, new beta-galactosidase and process for producing same
    米国出願 153,296(2.5'88)、デンマーク、EPC(英、仏、西独、オランダ)出願
    国内出願 昭62-026216に同じ
報告書他
  1. 高瀬光徳:掘越特殊環境微生物プロジェクト研究概要集 p.75(平成元年9月) 新技術事業団
  2. 高瀬光徳:日本農芸化学会 昭和62年度大会発表(昭和62年4月)
    「Thermus属細菌のbeta−グルコシダーゼ遺伝子のクローニングと発現」
  3. M.Takase,K Horikoshi:A thermostable B-glucosidase isolated from a bacterial species of the genus Thermus, Appl. Microbiol Bacteriol(1988)29:55〜60
  4. M.Takase,K.Horikoshi:Purification and Properties of a beta-Glucosidase from Thermus Sp.Z-1,Agric.Biol.Chem.(1989)53:559〜560
〔研究者名〕高瀬光徳、掘越弘毅

図1:酵素の作用温度曲線

図2:酵素活性のPHの影響


 
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