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研究成果集

トレハラーゼ

新規コリネバクテリウム属細菌、新規トレハラーゼおよびその製造法

研究成果の概要

新規トレハラーゼ(トレハロース分解酵素)を菌体内および菌体外へ生産するコリネバクテリウム属細菌を分離。
本菌を用いる耐熱性に優れた新規トレハラーゼの製造法を開発。(写真)、()

  1. 新菌株(FERM P-8484、8485、8486)
    菌体内および菌体外へ新規トレハラーゼを生産するコリネバクテリウム属細菌

  2. 新規トレハラーゼの性質
    至適pH:6.5〜7.5、至適作用温度:60DEG C近傍
    熱安定性:pH7.0、60DEG Cで15時間以上安定
    pH5.0〜10.0で、60DEG C、30分では安定

  3. 遺伝子組み換え
    新規コリネバクテリウム属に属する微生物由来の耐熱性トレハラーゼ遺伝子DNAをベクターを介して大腸菌へ導入し、形質転換体を得た。

  4. 新規トレハラーゼの製造法
    コリネバクテリウム属細菌をpH5〜9、55〜65DEG Cで培養し、菌体内・外ヘトレハラーゼを生産させる新規トレハラーゼの製造法、および耐熱性トレハラーゼ遺伝子DNAをベクターを介して大腸菌へ導入し、形質転換した大腸菌を培養して生産する耐熱性トレハラーゼの製造法。
成果展開可能なシーズ、用途等

耐熱性トレハラーゼ
新規トレハラーゼを生産するコリネバクテリウム属細菌および形質転換した大腸菌
  1. 固定化酵素、これを用いるバイオリアクター
  2. 診断薬
特許出願
  1. 新規トレハラーゼおよびその製法
    特   願:昭61-179588(昭61.7.30) 特開昭62-275682(昭62.11.30)
    出 願 人:新技術事業団、永山孝三、掘越弘毅、中村信之
    請求の概要:耐熱性に優れた新規トレハラーゼおよびこれを生産する微生物を培養し、菌体外あるいは菌体外かつ菌体内に新規トレハラーゼを生成・蓄積させる製造法。
  2. 耐熱性トレハラーゼ遺伝子DNA、該DNAを含む組み換え体プラスミド、形質転換体及ぴ耐熱性トレハラーゼの製法
    特   願:昭63-51779(昭63.3.7) 特開平1-225485(平1.9.8)
    出 願 人:新技術事業団、永山孝三、掘越弘毅
    請求の概要:好熱性細菌コリネバクテリウム属菌由来の耐熱性トレハラーゼ遺伝子DNA、大腸菌用ベクタープラスミドおよびこれを連結した組み換え体プラスミドとこれにより形質転換したエッシェリヒァ属の微生物。これらの微生物を培養する耐熱性トレハラーゼの製造法。

報告書他

  1. 永山孝三:掘越特殊環境微生物プロジェクト研究概要集 p.65(平成元年9月)
    新技術事業団
  2. 永山孝三:日本農芸化学会 昭和61年度大会発表(昭和61年4月)
    「トレハラーゼを生産する好熱性細菌の分離とその性質」
    「好熱性細菌corynedacteriumsp.(SBPK-512菌)の生産するトレハラーゼの精製とその性質」
  3. 永山孝三:日本農芸化学会昭和62年度大会発表(昭和62年4月)
    「大腸菌トレハラーゼの精製及び好熱性細菌No.K-512菌トレハラーゼとの比較検討」
  4. 永山孝三:日本農芸化学会 昭和63年度大会発表(昭和63年4月)
    「トレハラーゼ遺伝子のクローン化と発現」
    トレハラーゼ生産菌(K-512)の電子顕微鏡写真
    K-512トレハラーゼと大腸菌トレハラーゼの熱安定性
〔研究者名〕永山孝三、中村信之、掘越弘毅

写真:トレハラーゼ生産菌(K-512)の電子顕微鏡写真

図:K-512トレハラーゼと大腸菌トレハラーゼの熱安定性


 
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